مشخصات فنی ریل تایم PCR (ریل تایم پی سی آر) مدل LongGene +Q1000 :
- ۴۸ خانه
- ۴ کانال
- استریپ ۸ تایی ۰٫۱
- دما ۰-۱۰۵ درجه سانتی گراد
- ریل تایم PCR دارای نمایشگر لمسی
- بدون نیاز به لب تاپ
- دارای پورت اتصال به کامپیوتر
- هماهنگ با سیستم عامل ویندوز ۱۰،ویندوز ۷ و ویندوز XP
اصول اساسی ریل تایم PCR
واکنش زنجیره ای پلیمراز در زمان واقعی (Real-Time PCR) در یک سیکلر حرارتی با ظرفیت نورپردازی هر نمونه با یک پرتو نور حداقل یک طول موج مشخص و تشخیص فلورسانس ساطع شده توسط فلوروفور بر انگیخته انجام می شود.
سیکلر حرارتی همچنین قادر است نمونه ها را به سرعت گرم و سرد کند ، در نتیجه از ویژگی های فیزیکی و شیمیایی اسیدهای نوکلئیک و DNA پلیمراز بهره می برد.
روند PCR به طور کلی شامل یک سری تغییرات دما است که ۲۵-۵۰ بار تکرار می شود. این چرخه ها به طور معمول از سه مرحله تشکیل شده اند:
مرحله اول، در حدود ۹۵ درجه سانتیگراد ، اجازه می دهد تا زنجیره دوتایی اسید نوکلئیک جدا شود.
مرحله دوم: در دمای حدود ۵۰-۶۰ درجه سانتیگراد ، اتصال آغازگرها با الگوی DNA را امکان پذیر می کند ؛
مرحله سوم: در دمای ۶۸-۷۲ درجه سانتیگراد، پلیمریزاسیون انجام شده توسط DNA پلیمراز را تسهیل می کند.
به دلیل کوچک بودن قطعات، مرحله آخر معمولاً در این نوع PCR حذف می شود. زیرا آنزیم قادر است تعداد آنها را در طول تغییر بین مرحله تراز و مرحله دناتوراسیون افزایش دهد.
بعلاوه، در PCR چهار مرحله ای، فلورسانس در طی مراحل کوتاه دمایی که فقط چند ثانیه در هر چرخه طول می کشد، با دمای مثلا ۸۰ درجه سانتیگراد، اندازه گیری می شود تا سیگنال ناشی از وجود دایمرهای آغازگر (Primer Dimer) کاهش یابد. هنگامی که از یک رنگ غیر خاص استفاده می شود.
دما و زمان استفاده شده برای هر چرخه به طیف گسترده ای از پارامترها بستگی دارد، مانند: آنزیم مورد استفاده برای سنتز DNA، غلظت یونهای دو ظرفیتی و دی اکسی ریبونوکلئوتیدها (dNTP) در واکنش و دمای پیوند آغازگرها.
